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Tecnologia DNA ricombinante (D.M.270/04)

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Recombinant DNA Technology

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Anno accademico 2021/2022

Codice dell'attività didattica
MED 2889A
Docente
Dott. Salvatore Gallone (Docente Titolare dell'insegnamento)
Insegnamento integrato
Corso di studi
[f007-c311] laurea i^ liv. in tecniche di laboratorio biomedico (abil. professione sanitaria di tecnico di laboratorio biomedico) - a torino
Anno
3° anno
Periodo didattico
Secondo semestre
Tipologia
Di base
Crediti/Valenza
1
SSD dell'attività didattica
MED/03 - genetica medica
Modalità di erogazione
Tradizionale
Lingua di insegnamento
Italiano
Modalità di frequenza
Obbligatoria
Tipologia d'esame
Scritto ed orale
Prerequisiti
Insegnamenti 1° - 2° anno
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Sommario insegnamento

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Obiettivi formativi

L’insegnamento di Tecnologie del DNA  Ricombinante prevede trattazione delle più rilevanti e significative metodiche e delle relative applicazioni scaturite negli ultimi decenni a seguito delle nuove conoscenze nell’ambito della genetica e della biologia molecolare. Facendo riferimento alle principali acquisizioni scientifiche perseguite nell’ambito della moderna ricerca in campo genetico e biologico-molecolare, il corso si focalizza sulle basi teoriche e sulla successiva realizzazione ed implementazione delle principali tecnologie basate sul DNA ricombinante e sugli innumerevoli approcci diaghnostici e sperimentali .

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Risultati dell'apprendimento attesi

Il corso si propone di fornire allo studente una appropriata preparazione nella scelta, nella programmazione e nell’utilizzo delle principali tecniche e tecnologie della moderna ingegneria genetica. IN particolare lo studente verrà introdotto alla conoscenza di:

- tecniche del DNA ricombinante: cenni storici, metodologie

- Enzimi di restrizione 

- Clonaggio 

- sonde molecolari, marcatura del DNA

- Elettroforesi del DNA, 

- Southern Blot, 

- Tecniche di ibridazione, microarray

- La PCR, progettazione ed esecuzione. 

- Usi clinici della PCR

- Sequenziamento degli acidi nucleici, principi e principali tecniche in uso.

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Modalità di insegnamento

A causa dell'emergenza COVID-19, le lezioni teoriche si svolgeranno su webex. Verranno registrate e messe a disposizione sulla piattaforma Moodle .

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Modalità di verifica dell'apprendimento

test scritto a scelta multipla e/o colloquio orale

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Programma

1.Gli acidi nucleici: DNA e RNA. Cenni sulla trascrizione e sulla traduzione. Metodiche di estrazione. Utilizzo del DNA e dell’RNA nei saggi di ibridazione: Southern e Northern blotting, marcatura terminale del DNA: oligonucleotidi.

2.La Polymerase Chain Reaction (PCR): che cosa è, i parametri che si possono ottimizzare, come si disegnano i primer. Applicazioni della PCR: ricerca di mutazioni puntiformi note: metodi diagnostici; ricerca di mutazioni puntiformi sconosciute: metodi di screening.

3.Alcuni cenni sulla metodica di sequenziamento. La RT-PCR nell’individuazione delle traslocazioni cromosomiche. Cenni su nuove tecniche: Real Time PCR, microarrays applicati sia agli acidi nucleici che alle proteine.

4.Metodiche di  clonaggio  del DNA : cenni sull’identificazione di geni  possibili causa di malattia.

5.I microsatelliti del DNA: analisi su PAGE e con elettroforesi capillare. Applicazioni nel campo forense e nella ricerca del chimerismo post trapianto di midollo. Analisi di linkage.

6.Cenni su nuove tecniche: terapia genica e alcune sue applicazioni.

Testi consigliati e bibliografia

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Strachan and Read - Genetica molecolare umana 3° Edizione - Ed. Zanichelli

Boncinelli Simeone - Ingegneria genetica - 2° edizione  ED Idelson Gnocchi



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Note

2° Semestre

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Ultimo aggiornamento: 20/10/2021 17:48
Location: https://biomedico.campusnet.unito.it/robots.html
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